Acta Neuropathologica: MAP激酶p38γ降低tau介导的晚期记忆弱点

阿尔茨海默疾（AD）是最常见的脑中风，其特征是细胞外白斑含有淀粉样抗原β（Aβ）和由神经纤维tau抗原看成的细胞内无法解释。尽管我们对疾因有助于的理解有所增加，但是通过核酸Aβ或其从淀粉样样前形体抗原（APP）里面精制来病患AD的方式在大型动物模型里面没有显著的效用。因此，在在对疾因有助于和病患发展的探索主要集里面在tau。AD的各个方面可以在神经纤维里面表达人类APP的果蝇模型里面完成建模。APP转DNA果蝇表现为淀粉样白斑的完成性沉积。

我们那时候之前证明了，基因座特异性tau磷酸化可以抑制淀粉样抗原β（Aβ）可借的毒性讯号。细胞膜后生物合成原激活抗原（MAP）磷酸化p38γ介导了生物合成-205（T205）上tau的基因座特异性磷酸化。用于DNA病患的方式，我们利用这种神经保护有助于来改善两种Aβ依赖性的AD果蝇模型在后半期梦境缺点阶段的梦境。tau里面核酸T205的细胞膜后磷酸化p38γ活性的增加下降了有症状的Aβ诱发的AD模型的梦境缺点。用野生型人tau或磷酸化缺点tau T205A完成的新的分配实验表明，T205修饰对于p38γ的沿河效应至关重要，p38γ可以防止APP转DNA果蝇的梦境盲点。此外，对果蝇MaptDNA里面T205密码子的DNA组编辑表明，内源性tau里面的单侧链对APP转DNAAD果蝇的梦境缺点具备关键性的调节关键作用。在表达非致疾性tau的tau转DNA果蝇模型里面，通过DNAp38γ其会消除p38γ活性的保护关键作用，使tau具备毒性，并加剧人类Aβ其会时梦境功能损伤。因此，我们认为，调节神经纤维p38γ的活性是一种内在的tau抑制病患方式，可以增强后半期脑中风疾变的损伤观念。

方式：从额叶该组织里面纯化细胞膜形体的方式值得注意。简单地说，用于预先加热的匀浆器在30 mg 该组织/毫升的冰镇麦芽糖磷酸酶里面均匀化。通过离心（1400g，10min，4°C）清除匀浆后，将基质新的微粒在麦芽糖磷酸酶里面并最终离心（1400g，10 min，4°C）。新的分配上清液，最终离心，并在4°C下在13800 g下旋转上清液（总脑匀浆）10分钟。将基质新的微粒在麦芽糖磷酸酶里面，低层并在4°下以45000g离心45分钟。将Pellet新的微粒在5%的Ficoll里面，在13%的Ficoll上低层，在4°C下以45000g下离心45分钟。收集图形界面（细胞膜形体），在5%的Ficoll里面稀释，45°C下离心，收集上清液（非细胞膜）并在pH8磷酸酶里面洗涤沉淀并新的微粒在pH8磷酸酶里面，从而看成粗壮的细胞膜形体裂解物。在制备用于细胞内特罗斯季亚涅齐的电子束之前，测定不同组分的细胞内浓度。

综上所述，我们的研究结果表明，通过细胞膜后磷酸化p38γ核酸基因座特异性tau磷酸化是一种潜在的病患方式，可减轻现有Aβ可借的AD果蝇模型的梦境盲点。通过DNA病患载形体增加p38γ的活性是必需的，并且不会作出贡献tau疾理学改变，包括在高tau水平情况下。先前，我们找到p38γ在缺乏高Aβ水平的情况下限制了tau抑制梦境损伤，支持p38γ对tau毒性的都对。

Ittner, A., Asih, P.R., Tan, A.R.P. et al. Reduction of advanced tau-mediated memory deficits by the MAP kinase p38γ. Acta Neuropathol 140, 279–294 (2020).